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芯弃疾JX-8B数字ELISA产品

每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

数字ELISA测量蛋白质浓度远低于传统ELISA的能力源于两种效应：1）SiMoA对酶标记的高度敏感性；以及2）通过数字化蛋白质检测可以实现的低背景信号。任何免疫测定的灵敏度由其灵敏度决定。检测技术到标签，抗体亲和力，试验背景，以及背景测量值的变异（%CV）27.SiMoA对酶非常敏感标签（图2）为在数字ELISA中检测亚飞摩尔浓度的标记蛋白提供了基础。也就是说，对于给定亲和力的抗体，其灵敏度为免疫测定将由测定背景决定，SiMoA的高标记灵敏度有助于降低这种背景。对照实验表明，数字ELISA的背景来自于检测抗体和酶的非特异性结合（NSB）与捕获珠表面结合（补充表2）。AsSiMoA相比传统检测方法具有更高的标记灵敏度，明显减少了检测抗体（~1nM)和酶标记物（1–50pM)的需要，以检测结合事件，与传统方法相比（标记试剂浓度~10nM)。降低的标记物浓度减少了NSB到捕获表面，从而导致背景信号明显降低。 芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品，多重检测，同一样本就能测试2-6项指标；医学实验室数字ELISA开放

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它是一种DVD大小的圆盘，由24个阵列组成，每个阵列包含240微米大小的微孔，这些微孔呈径向排列，以便使用蓝光制造工艺和仪器内的液体处理并行处理。图2B显示了集成阵列及其相关流体通道的设计。每个阵列由216,000个40飞升大小的微孔组成，以六边形紧密排列模式排列在平面表面的3×4毫米区域内。每个微孔的标称尺寸为4.25?m直径、3.25?m深度和8?米中心间距。流体通道深0.5毫米，通道和流体入口端口的总体积为74?Lto，可容纳珠子和密封油溶液。通道中包含一个收缩部分以减少液体回流。微珠的分级是西莫亚技术的关键要求，微孔的几何形状足以容纳单个微珠（2.7?mdiameter；以下简称珠子）。西莫亚圆盘由环烯烃共聚物（COP）制造，因其具有高通量注塑成型的适应性，且成本低廉。具有良好的化学、生物和光学性能 进口数字ELISA微量试剂芯弃疾JX-8B简易版单分子ELISA检测产品，极速检测，检测用时只需要 15-30min！

芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品，使用现有平台就能做的单分子免疫检测；

参考的其他高灵敏检测方法：

两种更多测试的模拟分析信号放大技术是免疫PCR和生物条形码分析。免疫PCR通过将检测抗体标记为DNA分子，然后使用PCR进行扩增和定量，从而提高灵敏度。生物条形码分析利用了与DNA“条形码”标记的抗分析物纳米颗粒，这些纳米颗粒在与捕获在金微粒上的分析物结合后，从纳米颗粒上脱杂以进行定量。这两种方法相对于传统免疫分析法的灵敏度提高了10到100倍，但尚未整合到所需的全自动系统中，也未用于多重分析。为了比较大限度地加速药物发现、验证新型生物标志物并将分子水平诊断引入临床主流，需要一种具有高效率、高质量数据和成本效益的稳健、多重超灵敏蛋白质检测技术。

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动力学上，对于200,000个微球分散在100μL中，珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA（分别为17.3和30kDa）的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明，在2小时的孵育过程中，蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次，必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中，通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球（见下文），这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到，对应于泊松噪声的可接受变异系数（CV）为6-7%。第三，过高的微球浓度可能导致：a）非特异性结合增加，降低信噪比；以及b）分析物与微球的比例过低，导致活性微球的比例过低，从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿；可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时，为了获得可接受的背景信号（1%）和泊松噪声）。 芯弃疾JX-8B数字ELISA，微量多重检测，微量样本就能同时测试4项指标；

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只有少量分泌蛋白可测量的可能性突显了蛋白质测量领域面临的挑战：医学上相关的生物标志物可能存在于非常低的丰度中。免疫测定仍然是是蛋白质生物标志物敏感和特异性测量的基础。然而，传统的免疫分析技术在检测不可测量的生物标志物时灵敏度不足，这些生物标志物肯定位于当前可检测范围之下。主流的传统免疫分析方法——包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、化学发光和电化学发光——的灵敏度下限约为10^-13M（~<0.1pM)。许多降低灵敏度的方法已被描述，包括拉曼增强信号检测、电感耦合等离子体质谱，但这些方法的数据表明其成功有限。非常规方法如亚飞摩尔级检测具有明显的权衡，例如程序较长或无法提供定量答案。
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人类形式的蛋白质被加入到25%牛血清中以代替临床测试样本；通常使用四倍稀释因子以减少免疫测定中的基质效应4。使用数字ELISA检测25%血清中的PSA，从该实验中确定了LOD为~50aM（1.5fg/mL），相当于整个血清中的LOD为~200aM（6fg/mL）。检测到的比较低浓度为250aM，相当于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通过外推背景浓度来确定的加上背景的三个标准差，不同运行的LOD取决于背景的CV。在具有典型背景方差的几个实验中，全血清PSA的亚飞摩尔LOD得以保持。相比之下，一种前列的商业PSA检测方法(ADVIACentaur，西门子）报告在人血清中的LOD为3pM（0.1ng/mL），并且已经报道了LOD在10-30fM17,26。 医学实验室数字ELISA开放